昆山舒美测定山楂药材和小儿麦枣咀嚼片中枸橼

山楂、麦芽、神曲俗称“焦三仙”，其中山楂为蔷薇科 植 物 山 里 红 Crataegus pinnatifida Bge． Var． major N． E． Br． 或山楂 Crataegus pinnatifida Bge． 的干燥成熟 果实。小儿麦枣咀嚼片由山药、大枣、山楂和麦芽 4 味 药材经现代工艺制成，收载于国家食品药品监督管理局 药品标准 WS － 10409( ZD － 0409) － 2002 － 2012Z，临床 主要用于治疗小儿脾胃虚弱、食欲不振、食积不化，有健 脾和胃作用。

1 仪器与试药

1．1 仪器

Ultimate3000 型高效液相色谱仪，包括全自动进样 器、恒温柱温箱、VWD 检测器、变色龙 Chromeleon7 工 作站( 美国赛默飞世尔公司) ; AE240 型电子天平( 瑞士 梅特勒 － 托利多仪器公司) ; KQ － 500DE 型数控超声波 清洗器( 江苏昆山舒美超声仪器有限公司) 。

1．2 试药

山 楂 药 材( 批 号 分 别 为 181012，180502，180901， 181203，190101) 来源于攀枝花市中西医结合医院中药 房，经该院范胜莲副主任中药师鉴定为正品。小儿麦枣 咀嚼片( 葵花药业集团 ＜佳木斯 ＞ 有限公司，批号分别为 201801009，201811002，201812005，规格为每片 0． 45 g) ; 枸 橼 酸 对 照 品( 中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院 ，批 号 为 100396 － 201102，含量 99． 9% ); 甲醇为色谱纯，磷酸二 氢铵、磷酸均为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

色谱柱: Welch － C18 柱( 250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ; 流动相: 甲醇( A) － 0． 5% 磷酸二氢铵( B，磷酸调 pH 至 2． 8) 溶液( 5 ∶ 95，V / V) ; 流速: 0． 8 mL /min; 柱温: 25 ℃ ; 检测波长: 210 nm; 进样量: 10 μL。对照品溶液: 称取在 105 ℃ 干燥 2 h 后的枸橼酸对 照品 11． 98 mg，精密称定，置 10 mL 容量瓶中，加水定容， 作对照品贮备液; 精密吸取 2 mL 置 5 mL 容量瓶中，加 甲醇定容，作对照品溶液( 每 1 mL 含枸橼酸 0． 479 2 mg) 。供试品溶液: 取山楂药材( 批号 181012) ，粉碎，过 3 号筛，称取粉末 0． 5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精 密加水 50 mL，称定质量，静置 2 h，超声 ( 功率 270 W， 频率 40 kHz)处理 30 min，再次称定质量，用水补足减失 的质量，摇匀，经 0． 45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，作供 试品溶液Ⅰ。取小儿麦枣咀嚼片( 批号 201801009) 10 片， 研细，混匀，称取粉末 3． 0 g，精密称定，后同法操作，得 供试品溶液Ⅱ。线性关系考察: 取对照品贮备液作为 5 号对照品溶 液; 精密吸取 2 mL，置 10 mL 容量瓶中，作为 4 号对照品 溶液; 然后精密吸取对照品溶液各 1 mL，分别置 25，50， 100 mL 容量瓶中，作为 3 号、2 号、1 号对照品溶液。分 别 吸 取 上 述 1 ～ 5 号 对照 品 溶 液 各 10 μL，按 2． 1 项 下 色谱条件进样测定，以进样量( X，ng) 为横坐标、相 应 峰 面 积( Y) 为 纵 坐 标 进 行 线 性 回 归 ，得 回 归 方 程 Y = 0． 083 4 X + 3． 763 3，r = 0． 999 9( n = 5) 。结果表明， 枸橼酸进样量在 47． 92 ～ 11 980． 00 ng 范围内与峰面积 线性关系良好。

3 讨论

枸橼酸是极性较大的有机酸，通常应采用正相色谱柱进行分离，采用反相色谱柱分离时具有出峰速度快、不易 受溶剂峰影响的优点，且枸橼酸易溶于水，因此在制备供 试品时首先参考山楂药材中枸橼酸含量测定的处理方法。 采用水作为提取溶剂进行浸泡，由于浸泡所需时间长，因 此本试验中在浸泡的基础上又进行超声处理，提高了提取 效率。分别采用乙醇、50% 甲醇和水 3 种溶剂，结果发现 水 的 提 取 效 率 最 高 ，后 采 用 正 交 试 验 对 提取溶剂的 量、提取时间、超声功率等因素进行综合考察，最后确定 样品取样量为 3． 0 g，浸泡 2 h 后再超声 30 min 为最佳 提取方法。