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滇桂艾纳香分析(昆山舒美KQ-500E)

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-03-11 08:52【

1 材料 


1.1 仪器 


Agilent 1100型高效液相色谱仪(安捷伦公 司);XP205型电子天平(1/10万,梅特勒公 司);Milli-Q超纯水机(Millipore公司);KQ500E型医用数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);PCR仪(ABI VERITI);MM400球 磨仪(Retsch公司);微量紫外分光光度计(Nano Value);EPS-301电泳仪(Amersham公司);全 自动凝胶成像系统(Syngene公司)。 


1.2 对照品 


绿原酸(批号110753-201314)、3,5-O-二 咖啡酰基奎宁酸(批号111782-201807)和4,5-O二咖啡酰基奎宁酸(批号111894-201102)由中国 食品药品检定研究院提供;新绿原酸(批号NCA658144)、隐绿原酸(批号CCA-658288)和3,4- O-二咖啡酰基奎宁酸(批号DCA-250224)由成都 曼思特生物科技有限公司提供;1,3,5-O-三咖啡酰 基奎宁酸(批号TCK-662510)由上海诗丹德标准 技术服务有限公司提供。以上对照品经HPLC-DAD (面积归一化法)检测纯度均大于98.0%。


1.3 试剂 


乙腈(色谱纯,Fisher公司);磷酸、甲 醇(分析纯,国药集团化学试剂公司);植 物基因组DNA提取试剂盒(Plant Genomic DNAkit,TIANGEN);2×Taq Master Mix缓冲液 (GK8006,GENEray);ExRed(ZS203-1, 庒盟生物);琼脂糖(50002,Lonza);ITS2 引物(上海捷瑞生物工程有限公司,ITS2F:5'- ATGCGATACTTGGTGTGAAT-3';ITS3R:5'-GACG CTCTCCAGACTACAAT-3')。


1.4 样品 


6批滇桂艾纳香、7批东风草、3批高艾纳香均 由本课题组野外采集;同时制作相应的腊叶标本送 广西中医研究院,由黄云峰副研究员鉴定为滇桂艾 纳香B.riparia、东风草B.megacephala.、高艾纳香 B.repanda。1


2 基原鉴定及生药学鉴别


滇桂艾纳香腊叶标本于2018年3月19日采自广 西百色市右江区大王岭,为攀援状草质藤本。茎圆柱形,叶无柄,叶片卵状长圆形,边缘有疏生的点 状细齿,两面无毛或被疏柔毛。头状花序多数, 径5~8 mm,在腋生枝顶端排列成密圆锥花序,多 数小圆锥花序再排列成具叶的大圆锥花序,有长 5~10 mm的花序柄;总苞钟形或圆柱形。东风草标本于2018年3月21日采自贵州省兴义 市万峰湖,攀援状草质藤本或基部木质。茎圆柱 形,叶片卵形,边缘有疏细齿,下面无毛或多少被疏毛。头状花序疏散,直径1.5~2 cm,通常1~7 个在腋生小枝顶端排列成总状或近伞房状花序,再 排成大型具叶的圆锥花序;花序柄长1~3 cm;总 苞半球形。


3 薄层鉴别 


按滇桂艾纳香现行质量标准中的薄层鉴别方 法对滇桂艾纳香、东风草及高艾纳香进行对比试 验,结果发现,三者均具有相同的一个主斑点,表 明现行质量标准的方法缺乏专属性,需要对其薄层 方法进行更深入的研究。研究结果建立了两个自拟 方法,方法一是基于滇桂艾纳香中的主要成分(咖 啡酰基奎宁酸类)建立的,该方法可将高艾纳香与 滇桂艾纳香、东风草区别开;鉴于方法一未能有效 区分滇桂艾纳香及东风草,通过更换展开条件和显 色方法建立了方法二,该方法可将三者区分开,专属性较强。





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