安石榴苷的含量测定-昆山舒美KQ500DE使用

阿那日五味散由石榴皮、肉桂、砂仁、荜茇、干姜 ５味药材组成，具 有 温 胃、消 食 之 功，临 床 上 主 要 用 于胃脘寒湿、消 化 不 良、肾 寒 腰 痛 等 症 的 治 疗。 石榴皮多酚具有保护胃内粘膜的作用，石榴皮水浸 物能够增强大鼠胃蛋白酶活性，促进胆汁分泌，安 石榴苷为其主要活性成分，具 有 抗 氧 化、抗 菌、 抗病毒、抑制肿瘤细胞增殖等活性。

１ 仪器与试药 

１．１ 仪器 

ＬＣ－２０ＡＤ 型 高 效 液 相 色 谱 仪（日 本 岛 津公司），ＳＰＤ－Ｍ２０Ａ 型 光 电 二 极 管 阵 列 紫 外 可 见 光检测器（日本岛津公司），ＮｅｗＣｌａｓｓｉｃＭＦ型分析 天平 （瑞 士 梅 特 勒－托 利 多 公 司，ｄ＝０．０１ ｍｇ），ＫＱ５００ＤＥ型超声 波 清 洗 器（昆 山 市 超 声 仪 器 有 限 公司，功率２５０ Ｗ，频率１００ＫＨｚ），Ｍｉｌｌｉ－Ｑ 型艾柯 超纯水仪（美国密理博公司），ＡｇｉｌｅｎｔＺＯＲＢＡＸＳＢ－ Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）色谱柱（美国安捷伦 公 司 ），ＬＩＮＯＭＡＴ５ 型 半 自 动 点 样 仪 （瑞 士 ＣＡＭＡＧ 公 司），ＥＰＲＯＳＴＡＲ３型 薄 层 色 谱 数 码 成 像系统（瑞士 ＣＡＭＡＧ 公司）。 

１．２ 试 药 

阿 那 日 五 味 散 （自 制 制 剂，批 号 ２０１７０９１５；２０１７１２０１；２０１８０２０８；２０１８０４１０；２０１８０６２５）， 安石榴苷对照品（成都曼斯特生物科技有限公司，批 号 ＭＵＳＴ－１８０３０５０１，纯 度≥９８ ％），胡 椒 碱 对 照 品 （成都曼斯特生物 科技有限公司，批 号 ＭＵＳＴ－ １７０５１２１０，纯度≥９８％），硅胶 Ｇ 板（青岛海洋化工， 批号２０１８０４１２），硅胶 Ｇ 板（烟台市芝罘黄务硅胶开 发试验厂，批号２０１７１１０４），硅胶 Ｇ 板（安 徽 省 良 辰 硅源 材 料 有 限 公 司，批 号 ２０１８０３２８），甲 醇 （美 国ＳＩＧＭＡ 公 司，色 谱 纯），水 为 纯 化 水，试 剂 为 分 析纯。 

２ 方法与结果 

２．１ 阿那日五味散中胡椒碱的ＴＬＣ鉴别 

称取阿那 日五味散１．５ｇ，置于具塞锥形瓶中加入１０ｍＬ无水 乙醇，超声３０ｍｉｎ，滤过，即得供试品溶液。取胡椒碱 对照品适量，加无水乙醇制成浓度为５００μｇ／ｍＬ的 对照品溶液。按照处方配比和制备方法，制备１．５ｇ 不含荜茇的 阴 性 样 品，同 法 制 得 为 阴 性 样 品 溶 液。 分别取上述供试品溶液、阴性样品溶液各４μＬ和对 照品溶液３μＬ，点于同一硅胶 Ｇ 板上，以甲苯－乙酸 乙酯－丙酮（７∶２∶１）作 为 展 开 剂 展 开，取 出，晾 干， 置于紫外灯３６６ｎｍ 下 检 视，结 果 供 试 品 色 谱 图 与 对照品色谱图相同位置处显相同颜色的斑点，阴性 样品色谱图中相同位置处无斑点，见图１。

２．２ 阿那日五味散中安石榴苷的含量测定 

２．２．１ 对照品溶液的制备 

称 取 安 石 榴 苷 对 照 品 适量，制成浓度为５３１μｇ／ｍＬ的甲醇溶液，备用。 

２．２．２ 供试品溶液的制备 

称取阿那日五味散０．１ｇ， 置于５０ｍＬ容量瓶中，用甲醇超声提取３０ｍｉｎ，放 至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，备用。 

２．２．３ 阴性 样 品 溶 液 的 制 备 

称 取 不 含 石 榴 的 阿那日五味散阴性样品０．１ｇ，按“２．２．２”项下方法制备 阴性样品溶液，备用。 

２．２．４ 色 谱 条 件 

ＡｇｉｌｅｎｔＣ１８色 谱 柱（４．６ ｍｍ× ２５０ｍｍ，５μｍ），流动相：甲醇（流动相 Ａ）－０．１％三 氟乙酸（流动相 Ｂ），梯度洗脱条件（０～１０ｍｉｎ：Ａ％ 为５％→２０％，１０～２５ｍｉｎ：Ａ％为２０％→４０％，２５～ ３５ ｍｉｎ：Ａ％ 为 ４０％ →６５％，３５～４０ ｍｉｎ：Ａ％ 为 ６５％），进样量：１０μＬ，柱温：３０℃，检测波长：３７０ｎｍ， 流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ。

３ 讨论 

在对荜茇的 ＴＬＣ鉴别中，考察了不同检 视条件、不同波长以及不同显色剂对色谱结果的 影 响，结 果 表 明 在 紫 外３６６ｎｍ 直 接 检视的效果优于喷显色剂后的检视效果，最终确定 直接在紫外灯３６６ｎｍ 下检视。 安石榴苷对 照 品 溶 液 紫 外－可 见 区 全 波 长 扫 描 结果显示，安石榴苷于２５８ｎｍ、３７０ｎｍ 处均有较强 的紫外吸收，以２５８ｎｍ 为 检 测 波 长 的 ＨＰＬＣ 图 谱 表明样品中的其他物质峰与安石榴苷分离度不符合 色谱系统适用 性 的 要 求，在３７０ｎｍ 处 α－安 石 榴 苷 和β－安石榴苷响应值虽相对较低，但二者与其它物 质色谱峰分离度较好，因此确定安石榴苷的检测波 长为３７０ｎｍ。

免责声明：文章仅供学习和交流，如涉及作品版权问题需要我方删除，请联系我们，我们会在第一时间进行处理。